PRRSV变异株ORF5全基因的可溶性表达与重组蛋白的纯化

• 作者: 任颖超 单虎 黄娟
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 变异株 ORF5基因 可溶性原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 30-32
• 页数: 3页
• 分类号: S852.65+1
• 语种: 中文

摘要

为了获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株可溶性糖基化囊膜蛋白(GP5),从pMD18-T-ORF5(V)重组质粒中PCR扩增得到PRRSV变异株LX13(1)结构蛋白ORF5全基因编码区,并克隆至原核表达载体pCold TF DNA上,得到重组表达质粒pCold-TF-GP5 (V),转化大肠埃希菌BL21中诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western Blot鉴定分析.结果表明,目的基因插入位置和阅读框正确,成功表达的融合蛋白分子量约为75.2 ku,并以可溶性蛋白的形式存在,表达量约占菌体总蛋白含量的22.26％.该融合蛋白能与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应,说明重组蛋白具有反应原性.该可溶性重组蛋白的获得为研究PRRSV变异株GP5蛋白的抗原性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单虎	青岛农业大学山东省高校预防兽医学重点实验室	183	631	12.0	17.0
2	黄娟	青岛农业大学山东省高校预防兽医学重点实验室	32	77	6.0	7.0
3	任颖超	青岛农业大学山东省高校预防兽医学重点实验室	3	2	1.0	1.0