PRRSV GZJL株GP5基因的克隆及原核表达

• 作者: 周碧君 张双翔 文明 王开功 程振涛 罗险峰 陈军义
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 GP5基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 101-104
• 分类号: S858.28
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1573.2011.01.021

摘要

为成功表达PRRSV GZJL株GP5蛋白,本研究设计合成一对引物,并以PCR方法从阳性重组质粒pMD18-T-GP5中扩增得到PRRSV GZJL株GP5基因片段中的79～600 bp即dGP5.将dGP5基因连接至原核表达载体pET-32a(+),并转化入表达菌株BL21(DE3).经PCR、双酶切和测序鉴定,阳性菌株进行IPTG诱导表达,纯化的融合蛋白His-dGP5应用SDS-PAGE和Western-blotting方法进行分析,结果表明,本研究成功构建了原核表达菌株,其所表达的融合蛋白His-dGP5的分子量约为402 kDa且可被PRRSV阳性血清所识别.这为进一步研究PRRSV新型基因工程疫苗和诊断试剂奠定了基础.