PRRSV Hr-1/06株GP5蛋白基因的克隆及表达载体的构建

• 作者: 刘明莉 卢高峰 夏平安 李伟娟 王中明 邱璜
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: PRRSV GP5基因 RT-PCR 表达载体
• 年，卷（期）: 2008,（26）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 11260-11262
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 2487字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.26.042

摘要

[目的]克隆PRRSV Hn-1/06株GP5蛋白基因并构建其原核表达载体.[方法]根据PRRSV美洲株ATCC-VR2332的ORF5基因序列设计特异性引物,用RT-PCR方法从Hn-1/06株中扩增得到GP5蛋白基因的片段,与PTG19-T载体连接获得其阳性克隆PTG19-T-ORF5.以该基因片段为模板分别设计ORF5完整序列和删除信号肽的ORF5序列两条引物,进行PCR扩增,将目的片段与原核表达载体pET32a连接,并对其进行酶切鉴定.[结果]扩增得到GP5蛋白基因全长序列603 bp,编码200个氨基酸残基;具有3个潜在的N-糖基化位点和9个半胱氨酸;分子量为22.4 kD,等电点为8.550;双酶切pET32a-ORF5鉴定.结果与预期一致,证实重组质粒构建成功.[结论]成功构建了PRRSV Hn-1/06株GP5蛋白基因的表达载体,为深入研究GP5蛋白的本质与功能及其致病性奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏平安	河南农业大学牧医工程学院	65	271	9.0	14.0
2	王中明	河南农业大学牧医工程学院	13	37	3.0	6.0
3	李伟娟	河南农业大学牧医工程学院	9	42	4.0	6.0
4	卢高峰	河南农业大学牧医工程学院	9	12	2.0	3.0
5	刘明莉	河南农业大学牧医工程学院	9	14	2.0	3.0
6	邱璜	河南农业大学牧医工程学院	7	11	2.0	3.0