菊花CmAP1基因克隆及其植物表达载体构建

• 作者: 崔波 李霞 梁芳 袁秀云 黄萍
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 菊花 CmAPETALA1(CmAP1) 基因克隆 植物表达载体 生物信息学
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 952-959
• 页数: 8页
• 分类号: S682.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2017.06.02

摘要

[目的]克隆菊花CmAPETALA1基因(CmAP1)并构建植物表达载体,为该基因功能的遗传改良打下研究基础.[方法]采用同源克隆及RT-PCR从菊花叶片中克隆CmAP1基因,运用在线生物信息学分析工具对其核苷酸及氨基酸序列进行分析,利用实时荧光定量PCR对该基因的组织表达差异进行分析,并用双酶切法将目的基因与pCAMBIA1300载体连接,构建植物表达载体.[结果]克隆获得的CmAP1基因(GenBank登录号KU872999)编码区开放阅读框(ORF)长741 bp,编码246个氨基酸;CmAP1蛋白属亲水性蛋白,分子质量约28.3 kD、理论等电点(pI)为8.76,预测该蛋白内含10个磷酸化位点和2个潜在的N-糖基化位点;蛋白氨基酸序列比对和系统发育进化分析结果表明,CmAP1蛋白与CDM111蛋白的同源性达98%,属MADS-box基因家族A类基因的euAP1分支;实时荧光定量PCR分析结果表明,CmAP1基因在花蕾中表达量极高,在舌状花和筒状花中表达量较低,而在营养器官中仅痕量表达.将CmAP1基因连接到pCAMBIA1300载体上,可成功构建植物表达载体pCAMBIA1300-CmAP1.[结论]CmAP1基因在花的发育及形成过程中发挥重要作用,成功构建获得的植物表达载体pCAMBIA1300-CmAP1可为后期利用基因工程手段改变菊花花形态结构、调控花期及遗传改良打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔波	郑州师范学院生物工程研究所	93	393	10.0	13.0
2	袁秀云	郑州师范学院生物工程研究所	86	590	12.0	20.0
3	黄萍		11	34	3.0	5.0
4	梁芳	郑州师范学院生物工程研究所	36	129	7.0	9.0
5	李霞		2	2	1.0	1.0