籼稻GAD基因的克隆、序列分析及其植物表达载体构建

• 作者: 林忠辉 蔡小玲 许明 郑金贵 黄志伟
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 籼稻 谷氨酸脱羧酶(GAD) γ-氨基丁酸(GABA) 基因克隆 序列分析 载体构建
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 1079-1085
• 分类号: S511|Q781
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2012.08.1079

摘要

[目的]克隆籼稻谷氨酸脱羧酶(GAD)基因的全长cDNA,并进行序列分析和植物表达载体构建,为改良水稻的营养保健品质奠定基础.[方法]根据已知植物GAD基因的保守区域设计引物,以高GABA籼稻品系“新-9-4”的胚芽为材料,利用RT-PCR和RACE技术克隆GAD基因的全长cDNA；扩增其编码序列,构建双T-DNA植物表达载体.[结果]扩增获得长1962 bp的籼稻GAD基因全长cDNA(OsiGAD),包含1479 bp的开放阅读框,编码492个氨基酸.OsiGAD与已报道的水稻GAD基因OsGAD1、OsGAD2、OsGAD3的核苷酸序列同源性分别为67.1％、69.4％、98.3％,推导氨基酸序列的同源性分别为77.6％、70.1％、100.0％.OsiGAD蛋白序列具有磷酸吡哆醛结合位点和与钙调蛋白结合的C端延伸区域；构建了其具有水稻胚乳特异表达特性的双T-DNA植物高效表达载体pCDMAR-OsiGAD-hpt,选择标记基因和OsiGAD-因分别位于此载体的两个不同T-DNA区.[结论]克隆获得的籼稻GAD基因OsiGAD长1962 bp,并成功构建了其双T-DNA植物高效表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑金贵	福建农林大学农产品品质研究所	193	2701	27.0	42.0
2	许明	福建农林大学农产品品质研究所	38	194	8.0	11.0
3	黄志伟	福建农林大学农产品品质研究所	29	131	6.0	10.0
4	林忠辉	福建农林大学农产品品质研究所	1	2	1.0	1.0
5	蔡小玲	福建农林大学农产品品质研究所	1	2	1.0	1.0