猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因的克隆和原核表达

• 作者: 张敏 梅匀安 王晓杜 王鲁彦 袁庄川
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 基因 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4407字
• 语种: 中文

摘要

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）可引起各种年龄猪的呼吸系统和母猪繁殖机能障碍，导致猪场损失严重，其中 GP5蛋白在 PRRSV 病毒侵入、致病及免疫保护中发挥重要作用。提取猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组 RNA，反转录合成 cDNA，PCR 扩增获得 GP5基因，片段大小为600 bp。将 GP5基因亚克隆到原核表达载体 pGEX-6P-1上，菌落 PCR 和限制性内切酶双酶切鉴定，重组质粒 PGEX-6P-1-GP5构建成功，重组质粒转化大肠埃希菌 BL21（DE3），IPTG 诱导表达，SDS-PAGE 分析重组蛋白的表达，Western blot 分析重组蛋白的反应原性。结果表明，重组融合蛋白 His-GP5分子质量约为41 ku，主要以包涵体的形式存在，表达量占菌体总蛋白的35％以上，纯化后的重组蛋白占总蛋白的75％以上；并且该重组蛋白能与猪的阳性血清反应，说明其具有较好的免疫原性。研究结果为基因工程疫苗的研发和 GP5的抗体制备奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓杜	浙江农林大学动物科技学院	20	68	4.0	7.0
2	梅匀安	浙江农林大学动物科技学院	3	10	2.0	3.0
3	袁庄川	浙江农林大学动物科技学院	3	10	2.0	3.0
4	张敏	浙江农林大学动物科技学院	9	42	5.0	6.0
5	王鲁彦	浙江农林大学动物科技学院	2	6	1.0	2.0