猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 提金凤 李志杰 李舫 沈美艳 苏成文 袁东方
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 蛋白 真核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 36-42
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 6097字
• 语种: 中文

摘要

为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GP5蛋白单克隆抗体，首先构建猪 PRRSV GP5基因的真核重组表达载体 pCDNA-GP5，将其作为免疫原，对 Balb／c 小鼠进行免疫。取免疫4次后的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞 SP2／0进行融合。构建 PRRSV GP5基因的原核重组表达载体 pGEX-6P-GP5，将其转化至大肠埃希菌 Rosetta（DE3）并诱导表达。以表达的原核蛋白 GP5作为单克隆抗体的筛选抗原，通过间接ELISA 进行杂交瘤细胞株的检测和筛选。本研究成功构建了 GP5基因的真核重组表达载体 pCDNA-GP5，表达并纯化了 GP5蛋白。经2～3次亚克隆后获得3株针对 GP5蛋白的杂交瘤细胞株，IFA 和 Western blot 对3株杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行了鉴定。GP5蛋白单克隆抗体的成功研制，为进一步建立特异性 PRRSV 检测方法奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏成文		28	17	2.0	3.0
2	李舫		99	206	7.0	10.0
3	李志杰		36	76	5.0	6.0
4	提金凤		26	70	5.0	6.0
5	沈美艳		43	88	6.0	7.0
6	袁东方		3	5	2.0	2.0