猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 张改平 李青梅 王寅彪 王志红 王爱萍 郭军庆 陈稳
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 144-147
• 页数: 4页
• 分类号: S828
• 字数: 2950字
• 语种: 中文

摘要

为了制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV)的单克隆抗体,利用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PPRSV) GP5重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和NS0浆细胞瘤细胞进行融合,经间接ELBA和阻断ELISA筛选、有限稀释法克隆化获得3株能稳定分泌抗PRRSV GP5蛋白单克隆抗体的(mAb)杂交瘤细胞株,命名为4B7、2C5和2E4.间接免疫荧光(IFA)和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)结果显示,3株mAb均与感染PRRSV BJ -4株的Marc- 145细胞特异性反应,表明其可识别天然病毒蛋白.mAb的Ig亚类均为IgG1,细胞培养上清和腹水的ELISA效价分别为1∶256和1∶51 200,Western - blot分析表明,mAb均特异性识别PRRSV GP5蛋白.