猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 唐娜 张春玲 张松林 曲光刚 柳增善 沈志强 王金良 祖立闯 董林 谢金文
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 单克隆抗体 特性鉴定
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 27-31
• 页数: 5页
• 分类号: S858.28
• 字数: 3866字
• 语种: 中文

摘要

将猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV ）经密度梯度离心纯化后免疫Balb/c小鼠，取免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合，间接ELISA筛选能稳定分泌抗PRRSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并对制备出的单克隆抗体进行生物学与免疫学特性鉴定。结果成功筛选出3株能分泌IgG型单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为6A4、3F1和7F2。3株抗体均表现良好的特异性，ELISA方法检测与其他病毒及Marc-145细胞培养物无交叉反应，免疫荧光染色试验表明3株单克隆抗体均可不同程度地识别细胞中的病毒而呈现特异性荧光。Western blot说明6A4、7F2能够分别特异性识别25 ku和15 ku蛋白。试验初步表明6A4、3F1具有中和抗体活性，7F2不具有抗体依赖性增强（antibody dependent enhancement ，ADE）作用，但可以应用于PRRSV N蛋白检测。