貂源绿脓杆菌流行株toxA基因克隆序列分析及原核表达

• 作者: 单虎 张传美 杨海燕 王颖 秦志华 秦晓冰
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 绿脓杆菌 toxA基因 克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 38-41
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文

摘要

为了研究貂源绿脓杆菌流行株toxA基因的遗传变异情况,并将toxA基因进行原核表达,本试验以貂源绿脓杆菌DNA为模板,经PCR扩增表达外毒素A蛋白的toxA基因,约1917 bp的片段,将产物克隆与pM D-18T载体并测序.结果表明,12株流行株的序列与GenBank中的标准产毒株PA103株和PA01株的遗传关系较近,显示外毒素A毒性的氨基酸均未发生突变,流行株变异不大.将该基因亚克隆到原核表达载体pET32a,转化BL21(DE3)感受态细胞,经不同浓度的IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE与Western Blot鉴定,结果表明,可产生相对分子量约为78 kDa的表达产物,成功地构建了外毒素A蛋白的重组表达系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单虎	青岛农业大学动物科技学院	183	631	12.0	17.0
2	秦志华	青岛农业大学动物科技学院	28	102	6.0	9.0
3	秦晓冰	青岛农业大学动物科技学院	28	68	6.0	7.0
4	张传美	青岛农业大学动物科技学院	32	92	6.0	9.0
5	杨海燕	青岛农业大学动物科技学院	28	95	6.0	9.0
6	王颖		2	15	1.0	2.0