绿脓杆菌RNA降解蛋白PNPase与RNase E表达纯化及相互作用

• 作者: 方葆 沈国森 郭珍
• 来源期刊: 浙江临床医学
• 关键词: PNPase RNaseE 蛋白表达纯化 相互作用
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 检测诊断
• 页码范围: 2319-2321
• 页数: 3页
• 语种: 中文

摘要

目的 RNA降解复合体是RNA在生物体内更新的主要工具.PNPase通过3'到5'核酸外切酶降解RNA,Rnase E参与其调控.通过对绿脓杆菌RNA降解蛋白PNPase与Rnase E进行克隆表达纯化,并获取复合物蛋白,进而揭示PNPase与Rnase E对绿脓杆菌RNA的降解机制.方法对PNPase与Rnase E基因序列进行PCR扩增,构建重组质粒,分别转入E.coli BL21中表达,应用镍离子亲和层析,离子亲和层析和分子筛纯化目的蛋白PNPase与Rnase E;通过Pull-down方法验证PNPase和Rnase E的相互作用.结果成功克隆、表达、纯化绿脓杆菌PNPase与Rnase E蛋白,并通过Pull-down获得大量PNPase-Rnase E复合物.结论PNPase与Rnase E蛋白能相互作用并形成PNPase-Rnase E复合物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈国森		3	6	2.0	2.0
2	方葆		3	1	1.0	1.0