马立克氏病病毒648株囊膜糖蛋白gI基因的克隆和表达的研究

• 作者: 丁家波 卢银华 吉荣 崔治中 徐建生 赵文明 韦平 韩凌霞
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马立克氏病病毒 gI基因 表达 免疫荧光试验
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-10
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65|Q78
• 字数: 2897字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2001.01.003

摘要

根据马立克氏病病毒(MDV)强毒株GA的基因序列，设计和合成一对引物， 以特超强毒648株基因组DNA为模板，通过PCR技术，扩增其囊膜糖蛋白gI基因阅读框(ORF)中，除去其N_端编码疏水区的165个碱基对（bp）以外的其余部分；将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆到表性载体pGEX_6P_1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游；将重组质粒转化进大肠杆菌BL21株，在1.0mM IPTG浓度和30℃的条件下诱导，gI_GST基因融合蛋白获得了理想的表达；经聚丙烯酰胺凝脉电泳，Western_blot试验，验证其表达的融合蛋白产物大小为预期的63kD。将表达产物回收后免疫小鼠，所得抗血清可与MDV感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)在免疫荧光试验(FA)中呈细胞膜阳性染色。试验结果表明，在大肠杆菌中表达的648株MDV gI基因的融合蛋白产物保留了天然蛋白的某些抗原性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩凌霞	扬州大学畜牧兽医学院	9	54	5.0	7.0
2	丁家波	扬州大学畜牧兽医学院	12	153	7.0	12.0
3	崔治中	山东农业大学动物科技学院	339	5341	37.0	59.0
4	徐建生	扬州大学畜牧兽医学院	68	560	13.0	19.0
5	韦平	广西大学动物科技学院	310	2120	22.0	32.0
6	赵文明	扬州大学畜牧兽医学院	62	378	11.0	16.0
7	吉荣	扬州大学畜牧兽医学院	13	103	6.0	10.0
8	卢银华	扬州大学畜牧兽医学院	3	27	3.0	3.0