人肺癌细胞NHE-1基因部分正调控序列的克隆

• 作者: 吴国明 姚伟 钱桂生 黄桂君
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因 肺肿瘤 调控序列
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 125-127
• 页数: 3页
• 分类号: R394.3|R734.2
• 字数: 2535字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2001.02.002

摘要

目的　克隆人肺癌细胞Na+/H+交换泵-1(NHE-1)基因上游正调控序列部分，为进一步将该片段导入肺癌细胞株，竞争性结合转录因子，达到抑制细胞内NHE-1基因的表达奠定基础。方法　采用PCR技术从人肺癌A549细胞基因组中扩增长约170 bp 的NHE-1基因调控序列中起正调控作用的片段。在上、下游引物的5'-端带上BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点。然后将该片段连接到pUC18载体上。最后对产生的重组子进行酶切、PCR和测序鉴定。结果　经酶切及PCR鉴定，所克隆的目的片段大约为180 bp，而DNA测序证实克隆并插入到载体中的片段为目的片段,长度为168 bp，与报道的序列比较缺失2个t。结论　本实验已成功地克隆了人肺癌细胞NHE-1基因调控序列中正调控序列片段。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱桂生	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	591	5662	33.0	52.0
2	吴国明	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	67	542	10.0	21.0
3	姚伟	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	33	200	9.0	13.0
4	黄桂君	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	96	478	11.0	16.0