阳离子脂质体增加bcl-2反义寡脱氧核苷酸G3139在HL-60细胞中的摄取及活性

• 作者: 卓光生 朱元贵 陈志哲 陈晓春
• 来源期刊: 中国药理学报(英文版)
• 学科: 医学
• 关键词: 反义寡核苷酸类 脂类 HL-60细胞 bcl-2基因
• 年，卷（期）: 2001,（11）
• 页码范围: 1007-1012
• 页数: 6页
• 分类号: R96
• 语种: 英文

摘要

目的：探讨阳离子脂质体DOSPER对bcl-2反义寡脱 氧核苷酸G3139在HL-60细胞中的摄取和活性的影 响.方法：流式细胞仪测定细胞结合的平均荧光强 度和Bcl-2蛋白阳性细胞的百分数；荧光显微镜观察 细胞内FITC荧光素标记G3139的分布；RT-FCR测 定bcl-2 mRNA的表达.结果：①DOSPER增加细 胞对G3139的摄取，当DOSPER/G3139(μg∶μg)为 2∶1时，细胞对G3139的摄取在2 h左右达到高峰， 为G3139直接作用时的20倍，细胞核和细胞浆中的 G3139为明亮的点状聚集；而G3139直接作用时， G3139则弥漫分布于细胞浆中；②细胞内的G3139 可向胞外转运.DOSPER介导转染G3139 4 h后，细 胞内的G3139符合方程C(t)=68.2e-0.60t+ 31.8e-0.02t(初值为100％)，t1/2约为1.1 h，而 G3139直接作用后，细胞内的G3139符合方程C(t) =64.8e-2 27t+35.2e-0.04t，t1/2约为18 min；③在 DOSPER介导转染下，G3139在浓度1 μmol·L-1时， 特异性减少bcl-2 mRNA的表达，同时使Bcl-2蛋白 阳性率从97％±4％下降到70.6％±2.1％. 结论：DOSPER增加细胞对G3139的摄取和改变 G3139在细胞内的分布可能是其增强G3139活性的 重要机制.