在癌基因研究中应用巢式RT-PCR

• 作者: 刘永昌 孙俊宁 常竹鲜 李秀芳
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 反转录酶聚合酶链反应 肠肿瘤 卵巢肿瘤 基因,CK-19
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 202-204
• 页数: 3页
• 分类号: Q753
• 字数: 2361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2001.03.005

摘要

目的　讨论癌基因研究中应用巢式反转录聚合酶链反应(巢式RT-PCR)对目的　基因进行扩增的应用体会.方法　以巢式RT-PCR法检测55例大肠癌患者门静脉血和54例卵巢癌患者及10例妇科良性肿瘤病人骨髓中细胞角化蛋白基因-19(CK-19)mRNA的表达,并对实验方法　进行了改良和优化.结果　大肠癌中有54.5%(30/55)检得CK-19阳性,卵巢癌中有63.0%(34/54)检得CK-19阳性,10例妇科良性肿瘤无CK-19的表达.我们认为,为了能够在实验中得到好的扩增效果,整个RT-PCR操作中应把握以下几点:①要对用商品化试剂盒抽提到的总RNA样品在冷环境下重新沉淀、纯化;②在对反转录反应的温度控制方面,要注意高低温转换迅速彻底这一原则;③巢式引物的应用,能够使整个实验的特异性大为增高.结论　经过上述三方面措施改良后的巢式RT-PCR能够用来检测恶性肿瘤患者CK-19mRNA的表达,因而成为监测这类肿瘤患者造血及血液循环系中癌细胞分布情况的一种有效的分子生物学手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘永昌	山西省肿瘤研究所、山西省肿瘤医院放射生物室	9	72	4.0	8.0
2	孙俊宁	山西省肿瘤研究所、山西省肿瘤医院放射生物室	25	138	7.0	11.0
3	常竹鲜		1	0	0.0	0.0
4	李秀芳	山西省肿瘤研究所、山西省肿瘤医院放射生物室	5	7	2.0	2.0