大豆和花生根瘤菌氢酶的研究

• 作者: 刘广发 刘月英 张凤章 曾定 许良树 黄河清 龙敏南
• 来源期刊: 厦门大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 大豆根瘤菌 花生根瘤菌 吸氢酶 吸氢酶基因 吸氢基因转移
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 海洋学*生命科学
• 页码范围: 604-610
• 页数: 7页
• 分类号: Q945.13
• 字数: 4082字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-0479.2001.02.051

摘要

根瘤菌在共生固氮过程中因放H2所消耗的能量约占固氮总能量的40％～60％．吸氢酶则能回收和利用固氮过程所放的H2，减少能量损失，从而提高共生固氮效率．在厌氧条件下，加入防止酶蛋白聚合的试剂，利用DEAE-纤维素和SephacrylS-200柱层析，从自养性大豆根瘤菌和花生根瘤菌类菌体中分离并提纯膜结合态氢酶．纯化的两种氢酶表现相近的分子特征：均含有大(60 kD，65kD)、小(30 kD，35 kD)两个亚基；均为NiFe-氢酶，并具有较高的吸H2活性．大豆根瘤菌氢酶的纯酶组分不含Cyt b559．花生根瘤菌L8-3菌株能进行化能自养生长，诱导出高吸H2活性．根瘤菌的吸H2能明显提高固氮活性．从具有高吸H2活性的花生根瘤菌中分离并克隆吸氢基因，采用PCR和探针杂交技术，获得含有吸氢基因的质粒pZ-55．利用多种限制性内切酶构建了质粒pZ-55的物理图谱．通过三亲本杂交，将含吸氢基因的重组质粒转移到不吸H2的花生和毛豆根瘤菌中，所获得的结合株在自生和共生条件下均表达吸H2活性．以结合株接种大田花生，获得的共生根瘤的吸H2活性比接种受体株提高4倍，花生叶片和种子的含N量、产量分别提高1．7％、8．9％和9．6％．

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龙敏南	厦门大学生命科学学院	64	771	14.0	26.0
2	张凤章	厦门大学生命科学学院	13	169	6.0	13.0
3	许良树	厦门大学生命科学学院	10	49	4.0	6.0
4	刘广发	厦门大学生命科学学院	21	176	7.0	12.0
5	刘月英	厦门大学生命科学学院	37	938	17.0	30.0
6	黄河清	厦门大学生命科学学院	61	288	9.0	13.0
7	曾定	厦门大学生命科学学院	4	39	2.0	4.0