M2自身抗原及其三联体的克隆表达和初步鉴定

• 作者: 仲人前 姜小华 孔宪涛 朱烨 王皓 胡寅 范列英 陈军
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原发性胆汁性肝硬化 重组质粒 基因表达 自身抗原
• 年，卷（期）: 2001,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 530-533
• 页数: 4页
• 分类号: R57
• 字数: 2372字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-1432.2001.09.005

摘要

目的克隆人原发性胆汁性肝硬化(PBC)特异性抗体M2的三个靶抗原:支链2-氧酸脱氢酶(BCOADC)、丙酮酸脱氢酶(PDC)及2-氧戊二酸脱氢酶(OGDC)的部分基因片段.表达BCOADC、PDC、OGDC的抗原多肽片段,并将其连接形成三联体(BPO),用于PBC的早期发现和临床诊断.方法针对三个靶抗原表位设计引物,通过反转录PCR方法,从正常人的淋巴细胞中扩增相应的基因片段,克隆入表达载体pQE-30,构建重组表达载体pQE-30/BCOADC、pQE-30/PDC、pQE-30/OGDC、pQE-30/BPO,测定序列,转化大肠杆菌M15(prep4)后诱导表达.表达蛋白经SDS-PAGE、Western-blot鉴定.结果酶切鉴定和核苷酸序列测定结果表明,成功地构建了四种重组工程菌诱导表达后,经SDS-PAGE、Western-blot等证实四种抗原多肽片段获得表达,能与PBC病人起特异性反应.结论获得PBC的特异性靶抗原多肽片段,并成功构建三联体,为PBC的早期发现和临床诊断提供有力工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈军	第二军医大学长征医院全军临床免疫中心	41	277	11.0	14.0
2	仲人前	第二军医大学长征医院全军临床免疫中心	190	1029	15.0	21.0
3	孔宪涛	第二军医大学长征医院全军临床免疫中心	124	1102	16.0	29.0
4	范列英	第二军医大学长征医院全军临床免疫中心	16	95	6.0	9.0
5	朱烨	第二军医大学长征医院全军临床免疫中心	26	123	6.0	9.0
6	王皓	第二军医大学长征医院全军临床免疫中心	72	476	11.0	18.0
7	姜小华	第二军医大学长征医院全军临床免疫中心	3	21	2.0	3.0
8	胡寅	第二军医大学长征医院全军临床免疫中心	1	15	1.0	1.0