p16基因抑癌作用的体外实验

• 作者: 姚伟娟 廖晓蓓 张勇 文宗曜 梁玉 王新娟 王笑健
• 来源期刊: 中国学术期刊文摘
• 学科: 医学
• 关键词: p16基因 人红白血病细胞株 基因转移 生物流变学
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 页码范围: 371-372
• 页数: 2页
• 分类号: R318
• 语种: 中文

摘要

将多种肿瘤抑制基因p16转入该基因缺失的人红白血病细胞株K562，观察外源p16表达及其对肿瘤细胞的生物学作用。首先应用FuGene6介导将真核细胞表达载体pBABE-puro-p16和对照空载体pBABE-puro分别转入K562细胞，加入嘌呤霉素(1.5 μg/μL)筛选14天，得到了抗性细胞集落K562-p16和K562-puro。再应用PCR，RT-PCR和免疫组化法，从DNA，RNA和蛋白质三个水平上检测了外源p16的成功转入和表达。细胞生长曲线显示K562-p16细胞生长受到明显抑制。流式细胞术结果显示K562-p16细胞的G1期细胞分布增加，凋亡细胞数增加。电泳实验显示K562-p16电泳率明显加快，渗透脆性曲线表明其具有更好的抗渗透破碎能力。以上结果表明外源p-16基因对肿瘤细胞株K562用一定的抑制作用，主要表现为G1→S期阻断和诱发肿瘤细胞凋亡，并使K562细胞表面电荷明显增加，渗透脆性下降。