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摘要:
目的构建人胰胰岛素基因真核表达载体,为胰岛素基因研究奠定基础.方法从人基因组文库中扩增胰岛素基因的第一内含子,经测序证实其序列完全正确后,与pCMV-mINS中的mINS基因融合,构建成带有第一内含子的胰岛素基因组基因真核表达质粒pCMV-ImINS.分别用pCMV-mINS和pCMV-ImINS转染BHK细胞,经G418筛选,将阳性克隆传至20代后,用放免方法和免疫组化法分析胰胰岛素和/或胰岛素原在BHK细胞中的表达量情况.结果经放免测定,pCMV-mINS和pCMV-ImINS在BHK细胞中胰岛素和/或胰岛素原的表达量分别为4.077μIU/ml 和5.068μIU/ml.经免疫组化分析,pCMV-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为190.0±19.56;pCMV-ImINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为186.4±10.24.结论在BHK细胞中胰岛素基因的第一内含子对胰岛素的表达起正调控作用.
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文献信息
篇名 第一内含子对人胰岛素基因在BHK细胞中表达的影响
来源期刊 中国实验动物学杂志 学科 生物学
关键词 内含子 胰岛素,基因 细胞系 基因表达
年,卷(期) 2002,(5) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 257-262
页数 6页 分类号 Q756
字数 3591字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-7856.2002.05.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 董婉维 中国医科大学实验动物部 38 293 11.0 16.0
2 王吉贵 中国农业大学生物学院 21 124 7.0 10.0
3 齐顺章 中国农业大学生物学院 14 89 7.0 9.0
4 王苹 吉林大学耳鼻喉研究所 52 142 6.0 9.0
5 李华 中国医科大学实验动物部 56 397 12.0 18.0
6 刘维全 解放军军需大学军事兽医研究所 13 115 6.0 10.0
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研究主题发展历程
节点文献
内含子
胰岛素,基因
细胞系
基因表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国比较医学杂志
月刊
1671-7856
11-4822/R
16开
北京市朝阳区潘家园南里5号
1991
chi
出版文献量(篇)
4463
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15
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25033
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