启动子CMV和EF1α对人胰岛素基因在BHK细胞中表达的影响

• 作者: 刘维全 李华 王吉贵 王禄增 王萍 董婉维 齐顺章
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 启动区(遗传学) 人胰岛素基因 BHK细胞 表达
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 18-22
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 2273字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2003.01.006

摘要

目的构建人胰岛素基因真核高效表达载体,为胰岛素转基因研究奠定基础.方法用限制性内切酶SpeⅠ和HindⅢ消化pEF1α-GFP,回收1.2kb EF1α启动子,插入到pCMV-mINS的NruⅠ和HindⅢ位点中,获得重组质粒pEF1α-mINS;将pCMV-mINS和pEF1α-mINS分别转染BHK细胞,用G418筛选,阳性克隆传至20代后,分别用放免方法和免疫组化法分析胰岛素和/或胰岛素原在BHK细胞中的表达情况.结果经放免测定,pCMV-mINS和pEF1α-mINS在BHK细胞中胰岛素和/或胰岛素原的表达量分别为4.077μIU/ml 和6.897μIU/ml.经免疫组化分析,pCMV-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为190.0±19.56;pEF1α-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为181.4±18.45,在BHK细胞核中表达水平的灰度值为155.4±11.66.结论在BHK细胞中启动子EF1α启动胰岛素基因表达的活性比启动子CMV高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王禄增	中国医科大学实验动物部	73	713	14.0	23.0
2	董婉维	中国医科大学实验动物部	38	293	11.0	16.0
3	王萍	吉林大学耳鼻喉研究所	158	895	15.0	19.0
4	王吉贵	中国农业大学生物学院	21	124	7.0	10.0
5	齐顺章	中国农业大学生物学院	14	89	7.0	9.0
6	李华	中国医科大学实验动物部	56	397	12.0	18.0
7	刘维全	解放军军需大学军事兽医研究所	13	115	6.0	10.0