利用肠激酶加工融合蛋白的方法制备重组人甲状旁腺素(1～34)肽

• 作者: 俞璎 修朝阳 周贺钺 戴金凤 陈常庆
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲状旁腺素 肠激酶 脱水糜蛋白酶亲和柱 亲和纯化
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 469-474
• 页数: 6页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

采用全基因分段合成和补丁连接相结合的方法构建了人甲状旁腺素(hPTH)(1～34)肽基因, 并利用GST融合表达系统, 在大肠杆菌中克隆和可溶性表达了hPTH(1～34)肽基因. 融合蛋白表达量占菌体总蛋白质的25%以上, 经高密度发酵、亲和纯化后, 在每升发酵液中得到了10 g融合蛋白. 融合蛋白经肠激酶一步加工并亲合纯化和反相脱盐后, 最终可以得到约0.6 g /L人甲状旁腺素(1～34)肽纯品, 样品的理论回收值达到了48.75%. 产物的纯度和性质经HPLC、毛细管电泳、质谱分析、 N端测序等得到证明, 并与化学合成产物的结果相吻合. 兔肾皮质细胞测活表明, 重组产物与化学合成人甲状旁腺素(1～34)肽具有相近的腺苷酸环化酶激活活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈常庆	中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心	36	310	8.0	17.0
2	修朝阳	中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心	8	139	6.0	8.0
3	俞璎	中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心	2	15	1.0	2.0
4	周贺钺	中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心	2	8	1.0	2.0
5	戴金凤	中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心	1	0	0.0	0.0