重组人β干扰素-1b的融合表达及制备

• 作者: 刘日勇 罗岚 范开
• 来源期刊: 重庆理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: β干扰素 肠激酶 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 40-43
• 分类号: R752
• 字数: 2361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8425-B.2010.04.008

摘要

通过融合表达获得无需复性的重组人β干扰素-1b(17Ser-β-IFN).运用PCR方法扩增带有EK(肠激酶)蛋白酶酶切位点的人β干扰素-1b基因,构建重组表达栽体pET32-a-EK-β-IFN-1b,通过工程菌(pET32-a-EK-β-IFN-1b/Qrigami DE3)表达融合蛋白TRX-β-IFN-1b.经纯化的融合蛋白,在一定的酶切条件下用EK酶酶切后,通过反相C18柱纯化获得高纯度的重组人β-IFN-1b,再经细胞病变抑制法测定其抗病毒比活性.结果表明,TRX-β-IFN-1b融合蛋白表达量达到茵体总蛋白的30%以上,EK酶酶切效率不低于90%.制备的重组人β-IFN-1b的质谱分子量与理论值一致,抗病毒活性比国内外报道的相同蛋白高出2倍以上,达到4.5 x107IU/mg.通过融合表达制备的重组人β-IFN-1b具有治疗多发性硬化症或肝炎的临床价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗岚		5	23	2.0	4.0
2	范开		18	38	3.0	5.0
3	刘日勇		1	2	1.0	1.0