重组糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂的表达和纯化

• 作者: 查艳萍 秦永文 穆瑞斌 荆清
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂 GST-KGDX融合蛋白 抗血小板作用
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 535-539
• 页数: 5页
• 分类号: R973.2|R331.143|Q78
• 字数: 4088字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2002.06.012

摘要

观察糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂重组GST-KGDX(谷胱甘肽S-转移酶-赖-甘-天冬-X)融合蛋白对血小板聚集的抑制作用.设计合成了两条编码KGDX(赖-甘-天冬-X)的寡核苷酸链,两端分别为BamHI和XhoⅠ酶切位点.将该基因插入原核高效表达载体pGEX-4T-1的tac启动子下游,获得重组质粒pGEX-4T-1KGDX,转化大肠杆菌DH5a,37℃诱导使重组子表达.GST-KGDX融合蛋白具有可溶性,产量为35 mg/L培养基,表达量占菌体总蛋白的48.02%.破碎菌体上清经谷胱甘肽-琼脂糖悬珠亲和层析法获得纯度为95%的重组蛋白.血小板凝聚仪检测活性表明,在体外GST-KGDX融合蛋白抑制ADP诱导的人血小板聚集作用强于GST(P＜0.05或＜0.01).全血流式细胞术结果表明,GST-KGDX能与GPⅡb/Ⅲa受体特异性结合.结论:大肠杆菌中能够表达出较高产量的GST-KGDX融合蛋白,为抗血小板药物提供了一个很好的蛋白质来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦永文	上海第二军医大学附属长海医院心内科	51	364	11.0	16.0
2	荆清	上海第二军医大学附属长海医院心内科	1	1	1.0	1.0
3	穆瑞斌	上海第二军医大学附属长海医院心内科	1	1	1.0	1.0