双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统的构建及体外效应研究

• 作者: 周华荣 张悦 曹利民 朱慧芬 杨敬 沈关心 王骞 邵静芳
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HSV-tk基因 转铁蛋白受体 GALA 受体介导内吞
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 243-247
• 页数: 5页
• 分类号: R730.59-3
• 字数: 3424字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2002.04.004

摘要

目的:构建高靶向性基因转移及表达系统,并研究其介导HSV-tk/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的体外杀伤作用.方法:通过重组技术分别构建anti-TfR ScFv-GALA融合蛋白表达载体ScFv-GALA-pET28a及含AFP启动子、GALA特异性识别序列(GAL4rec)的HSV-tk真核表达载体pEBAF/tk-GALArec.IPTG诱导后,利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tk-GALArec质粒转染表面均高表达TfR的人肿瘤细胞株HepG2,SMMC7721及A549.潮霉素筛选后,MTT法检测GCV对它们的杀伤作用.结果:双酶切鉴定、SDS-PAGE电泳及测序分别证明anti-TfR ScFv-GALA融合蛋白及重组pEBAF/tk-GALArec真核表达质粒构建成功.体外杀伤实验中,高分泌AFP(845 ng/ml)的HepG2/tk细胞对GCV很敏感,且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关;而低分泌AFP(2 ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感;不分泌AFP的A549/tk细胞则不敏感.结论:双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统构建成功,并显示出很好的靶向性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱慧芬	华中科技大学同济医学院免疫学系	45	154	8.0	9.0
2	张悦	华中科技大学同济医学院免疫学系	51	270	8.0	15.0
3	曹利民	无锡市第三人民医院检验科	4	31	2.0	4.0
4	邵静芳	华中科技大学同济医学院免疫学系	16	48	4.0	6.0
5	杨敬	华中科技大学同济医学院免疫学系	14	27	3.0	4.0
6	王骞	华中科技大学同济医学院免疫学系	4	28	2.0	4.0
7	周华荣	华中科技大学同济医学院免疫学系	2	9	1.0	2.0