丙型肝炎病毒核心蛋白在昆虫细胞中表达、加工和细胞定位研究

• 作者: 侯利华 杜桂鑫 王海涛 童贻刚
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 杆状病毒 昆虫细胞 丙型肝炎病毒 核心蛋白 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 198-204
• 页数: 7页
• 分类号: R512.6
• 字数: 5429字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2002.03.002

摘要

以杆状病毒-昆虫细胞表达系统Bac-to-Bac为模型,就目前存在较多争论的HCV核心蛋白的加工和细胞定位问题进行探讨.根据核心蛋白的亲水性分析结果,设计了三种长度的基因片段(C173、C191和C215),经过PCR扩增、重组转移载体构建、细菌内转座和昆虫细胞转染,获得三种重组病毒(rvBACC173、rvBACC191和rvBACC215)用于表达分析.SDS-PAGE电泳和免疫印迹试验表明,昆虫细胞能够识别核心蛋白第191和192位氨基酸之间的切点并低效率切割;但不能够识别173～191位之间的切点.间接免疫荧光试验表明,截断型核心蛋白C173定位于细胞核内,而C191和C215则停留在细胞浆中.rvBACC173感染的细胞在核内出现单一的"类晶体样结构",电子显微镜分析证实,这种结构是截断型核心蛋白大量转运并沉积在细胞核内形成的蛋白聚合体.试验结果还表明,第173至191之间的疏水性序列负性调节蛋白的表达,并且影响蛋白在细胞内的分布.间接ELISA实验证实,部分纯化的核心蛋白可用作诊断试剂检测人血清中的特异性抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王海涛	军事医学科学院微生物流行病研究所应用分子生物学实验室	99	537	11.0	18.0
2	童贻刚	军事医学科学院微生物流行病研究所应用分子生物学实验室	58	363	11.0	17.0
3	杜桂鑫	军事医学科学院微生物流行病研究所应用分子生物学实验室	19	60	4.0	7.0
4	侯利华	军事医学科学院微生物流行病研究所应用分子生物学实验室	28	112	5.0	9.0