体细胞多位点基因打靶技术的研究

• 作者: 唐冬生 施家琦 田允波 顾万军
• 来源期刊: 佛山科学技术学院学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 多位点 基因打靶 体细胞 多拷贝序列
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 农业与生物技术
• 页码范围: 64-69
• 页数: 6页
• 分类号: Q3
• 字数: 3471字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0171.2002.02.016

摘要

该研究利用多拷贝序列作为靶位点进行多位点基因打靶技术的研究.通过显微切割、菌落杂交、Southern杂交等方法获得人类D,G组染色体短臂多拷贝序列(DGMS),然后利用DGMS构建含Neo/TK基因正负选择系统的基因打靶载体.采用电穿孔、G418和GCV筛选进行Neo基因的基因打靶,并经PCR,FISH定位,Neo基因表达等证实Neo基因定点整合到D,G 组染色体短臂且表达;最终建立了一种有效的、多个安全位点的基因打靶技术.该技术可应用于体外细胞和动植物的转基因,甚至人类的基因治疗.