检测鸡传染性鼻气管炎病毒抗体的间接ELISA方法的研究

• 作者: 刘佩兰 刘洪云 吴延功 彭丽英 曲志娜 杜元钊 潘饶苘 王永玲 王玉东 田文霞 黄素珍
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性鼻气管炎病毒 间接酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 198-202
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 5583字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2002.03.012

摘要

分别用绿猴肾细胞和鸡胚成纤维细胞增殖鸡传染性鼻气管炎病毒NL 7784株,提纯抗原建立了检测鸡传染性鼻气管炎病毒抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA).试验的最佳反应条件为:抗原最佳稀释度为1:160,酶标抗体为1:1000稀释,待检血清为1:160稀释,包被液为pH9.6的碳酸盐缓冲液,6%犊牛血清(CS)作封闭液,稀释液用含10%CS的Tween-20磷酸盐缓冲液,洗涤液用含0.5%Tween-20的磷酸盐缓冲液,抗原与抗体的最佳反应时间为30分钟,底物的反应时间为15分钟.与中和试验进行了比较,证明所建立的方法具有良好的特异性、稳定性、可重复性和较高的敏感性.