OVA-接头-β2m融合基因的构建及体内特异性CTL 的诱导

• 作者: 钱丽 钱关祥
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 四聚体 基因表达 纯化 复性 CTL
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 547-552
• 页数: 6页
• 分类号: Q7
• 语种: 英文

摘要

构建融合基因OVA-接头-β2m的表达载体, 通过接头(linker)序列使β2微球蛋白(β2m)与肽段共价结合, 限制其在体内的扩散, 以期获得更具潜力的免疫原结构. 采用PCR技术, 从人肝癌细胞株SMMC-7721中克隆人β2m基因, 拼接上卵白蛋白(OVA) (257-264)序列及接头后, 克隆入pET-42b( + )高效表达载体进行诱导表达. 对表达产物进行纯化与复性后, 用其作为免疫原诱导特异性CTL, 并构建H-2Kb四聚体检测特异性CTL. 应用H-2Kb四聚体对特异性CTL检测结果与经典的细胞毒试验一致, 同时对胞外IFN-γ进行了定量检测. 结果表明, OVA-接头-β2m的表达产物可有效诱导体内特异性CTL反应, 在体外构建MHC-I类分子四聚体, 为特异性T细胞的检测提供了有利的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱关祥	上海第二医科大学分子生物学实验中心	39	186	7.0	11.0
2	钱丽	上海第二医科大学分子生物学实验中心	8	35	4.0	5.0