PCR法筛选日本血吸虫cDNA文库中磷酸丙糖转移酶基因

• 作者: 汪学龙 沈际佳 童畅
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 基因文库/血吸虫,日本自由词 磷酸丙糖转移酶
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 3-5
• 页数: 3页
• 分类号: R383.24|R394.2|R446.9
• 字数: 1851字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2002.01.002

摘要

目的用PCR法自日本血吸虫童虫cDNA文库筛选磷酸丙糖转移酶(TPM)基因,为进一步亚克隆和表达奠定基础.方法根据GeneBank中的日本血吸虫TPM基因开放阅读框设计合成一对引物,应用PCR测定cDNA文库中该基因的频率.根据测得的频率,将适量的噬菌体接种于96孔细胞培养板上进行细菌培养扩增.再利用PCR鉴定阳性克隆所在位置,经过选择性扩增,筛选出阳性克隆,并环化成质粒,经测序验证后构建pGEM-T/TPM克隆载体.结果经过3轮筛选,所得阳性克隆经过测序,用Genebank BLAST进行序列比较,证实为日本血吸虫磷酸丙糖转移酶基因.重组质粒pGEM-T经双酶切证实有约760 bp的插入片段.结论从日本血吸虫cDNA 文库中筛选出TPM基因,并成功地构建该基因的克隆载体,为研究该基因在血吸虫糖代谢中的作用创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈际佳	安徽医科大学病原生物学教研室	84	364	10.0	14.0
2	汪学龙	安徽医科大学病原生物学教研室	113	471	11.0	16.0
3	童畅	安徽医科大学病原生物学教研室	3	34	2.0	3.0