抗meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉抗体的酶学性质研究

• 作者: 丁兰 丁天兵 刘志强 刘立岩 张玉静 祁超 赵大庆
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉 单克隆抗体 全抗原 过氧化物酶
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 页码范围: 530-534
• 页数: 5页
• 分类号: Q554
• 字数: 4910字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0251-0790.2002.04.004

摘要

利用小分子meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉作为全抗原免疫小鼠, 通过细胞融合等技术制备了单克隆抗体(McAb)1F2, 利用高效液相色谱(HPLC)、基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI/TOFMS)证明纯化得到的单抗是很纯的. McAb 1F2的保留时间是2.63 min, 亚型为IgG2a, 相对分子量为156 678.8. McAb 1F2-卟啉复合物形成时, 卟啉Soret带最大吸收峰从408 nm红移到416 nm, 并有增色效应, 说明McAb 1F2-卟啉是刚性且紧密结合. 抗体酶稳定性很高, 但比活力只有4.687 5 U/mg, 为天然酶HRP的1899%. 抗体酶的Km=20.29 mmol/L, kcat=396.82 min-1, kcat/Km=1.955 7×104 L*mol-1*min-1.