牛bFGF-pcDNA3在人脐静脉内皮细胞中的表达及鉴定

• 作者: 宁波 崔蕴霞 张胜 徐霖 曹开源 郭琳洁
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 成纤维细胞生长因子,碱性 脐静脉 内皮细胞
• 年，卷（期）: 2002,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1228-1232
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 3775字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2002.10.015

摘要

目的:研究牛bFGF-pcDNA3在体外培养人脐静脉内皮细胞中的表达与活性,及对该细胞生物学特性的影响.方法:脂质体法将bFGF-pcDNA3真核表达载体转染体外培养的人脐静脉内皮细胞,经G418筛选阳性克隆.通过免疫细胞化学法检测bFGF的表达部位及Ⅷ因子相关抗原的表达.应用化学发光Western blotting法检测bFGF在转染细胞与未转染细胞中的表达.绘制细胞的生长曲线并计算倍增时间,采用MTT法对bFGF的生物活性进行估计.结果:bFGF-pcDNA3转染人脐静脉内皮细胞后,细胞呈梭形者增多.免疫细胞化学证实转染前后细胞均为血管内皮来源细胞,转染与未转染细胞均在胞浆内表达bFGF.Western blotting证实细胞转染前后均表达17kD bFGF,但转染后表达量增高,细胞生长曲线上移,倍增时间缩短.MTT法证实转染细胞产生的bFGF其生物学活性约相当于持续添加外源性bFGF 571.4 ng/L.结论:转染bFGF cDNA的人脐静脉内皮细胞能在体外增殖,并具有表达与分泌活性bFGF的功能.bFGF-pcDNA3可引起内源性bFGF表达增高,对血管内皮细胞产生相应的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹开源	中山大学中山医学院免疫学教研室	61	218	8.0	10.0
2	徐霖	中山大学中山医学院免疫学教研室	37	123	6.0	9.0
3	张胜	中山大学中山眼科中心	7	53	3.0	7.0
4	宁波	中山大学中山医学院免疫学教研室	10	30	4.0	5.0
5	崔蕴霞	暨南大学生命科学院	7	26	2.0	5.0
6	郭琳洁	中山大学中山眼科中心	4	29	2.0	4.0