用噬菌体展示技术筛选日本血吸虫免疫原的模拟短肽

• 作者: 周东明 张顺科 易新元 曾宪芳 李忠杰 王庆林 王敏 章洁 袁仕善
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 模拟短肽 免疫筛选 噬菌体随机肽库
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 295-298
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 4329字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2002.03.023

摘要

目的从噬菌体随机12肽库免疫筛选出大鼠对血吸虫天然抗性的模拟靶表位,探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果. 方法用粗提大鼠血清IgG作固相配体筛选噬菌体12肽库,按吸附-洗脱-扩增的淘洗过程进行3轮筛选;随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性,并对其中的2个克隆进行测序;用混合噬菌体克隆免疫小鼠3次,分别在0、1、3周进行,第5周每鼠经腹部感染40±1条日本血吸虫尾蚴,45 d后剖杀冲虫,计虫数及肝卵数. 结果经3轮筛选,特异性结合噬菌体富集增加了200多倍,随机挑取20个噬菌体克隆经ELISA鉴定,有19个克隆能与大鼠血清呈特异性反应.自动测序仪测序的2个克隆的序列与GenBank的已知序列无同源性.与对照组相比,混合噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为33.6%,减卵率为59.8%. 结论利用噬菌体展示技术可获得天然抗血吸虫抗性的短肽,这些短肽分子能诱导一定程度的保护性免疫