阳性水牛、黄牛IgG筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库

• 作者: 冯金涛 张欣 李浩 林矫矫 袁炜 许瑞 金亚美 陆珂 韩愉
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 日本血吸虫 水牛 黄牛 筛选 噬菌体展示cDNA文库
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 62-67
• 页数: 6页
• 分类号: S852.735
• 字数: 4081字
• 语种: 中文

摘要

为寻找有效的家畜日本血吸虫病诊断抗原,从感染日本血吸虫的水牛、黄牛血清中纯化IgG,以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫(44日龄)噬菌体展示cDNA文库.经每种动物IgG三轮(总计六轮)筛选后,随机挑取53个阳性噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析.获得了9个EST序列,其中7个EST序列与已知基因或表达序列标签同源,2个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,以噬菌体展示载体的10B衣壳蛋白开放阅读框(open reading frame,ORF)为依据,对上述7个与GenBank数据库资料同源的EST进行对码分析,结果7个EST序列能和噬菌体展示载体阅读框对码,为有效展示序列.其中3个EST具有较高的重复度,在51个有效克隆中,25个为HSP70 homolog基因,15个为Keratin9基因有重复,6个为Ornithine--oxo-acid transaminase基因.研究结果显示,HSP70 homolog基因、Keratin9基因和Ornithine--oxo-acid transaminase基因作为诊断家畜血吸虫病候选抗原基因,值得进一步开展克隆、表达和诊断效果评估方面的研究.