检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的研究

• 作者: 温博海 王安容 王易伟 蹇锐 钟敏 陈荣
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分枝杆菌,结核 利福平 基因型 聚合酶链反应 多态现象,单链构象
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 38-41
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 3069字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1009-9158.2002.01.011

摘要

目的建立聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的方法,并评价其临床应用的价值.方法依据结核分枝杆菌rpoB基因的耐利福平决定区设计引物,用PCR从临床分离株和直接从痰标本中扩增rpoB基因片段;对扩得的rpoB基因片段做DNA SSCP分析,并随机测定rpoB片段的序列.结果 PCR从所有212株结核分枝杆菌中均扩得230 bp片段,135份抗酸染色阳性的痰标本中,有113份扩得阳性片段(83.7%).在SSCP分析中,140份经L-J药敏试验检测为利福平耐受的结核分枝杆菌,有130份有rpoB基因突变(符合率为92.9%),72份经L-J药敏试验检测为利福平敏感的菌,有67份的rpoB基因无突变(符合率为93.1%).测序分析发现57份经SSCP检测为突变的rpoB片段均有序列改变,10份经SSCP分析为无突变的有8份无序列改变,SSCP与测序结果的符合率为94.0%.在本研究的菌株中,耐多药结核病(MDR-TB)占76.4%(107/140),有92.5%(99/107)耐多药菌株经SSCP检测有rpoB突变.结论建立的PCR-SSCP分析方法,是一种较准确和稳定的检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的方法,可用于临床快速分析患者结核分枝杆菌对利福平的耐药性,并可作为MDR-TB判断的一个重要指标.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟敏	重庆市肺科医院检验科	24	272	9.0	16.0
2	温博海	第三军医大学微生物学教研室	19	201	8.0	14.0
3	王安容	重庆市肺科医院检验科	14	145	8.0	12.0
4	蹇锐	第三军医大学微生物学教研室	28	183	8.0	12.0
5	陈荣	第三军医大学微生物学教研室	8	115	7.0	8.0
6	王易伟	重庆市肺科医院检验科	16	129	6.0	11.0