人白细胞介素18半胱氨酸的定点突变及其对活性的影响

• 作者: 傅奕 孙亚锋 裴冬生 赵惠仁
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 白细胞介素18 半胱氨酸 定点突变 突变体
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 57-61
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

为研究IL-18结构与功能的关系, 用重叠延伸PCR定点突变技术构建人白细胞介素 18 (hIL-18)4个半胱氨酸的突变体hIL-18 C74S、 C104S、 C112S和C 163S. 将突变体的cDNA与原核细胞表达载体pJW2重组并转化大肠杆菌JM101. 经热诱导后, 4个突变体在大肠杆菌中均得到了高效表达. 表达的蛋白质主要以包涵体的形式存在. 包涵体经超声破碎, 2 mol/L尿素洗涤, 8 mol/L尿素溶解, Sephadex G-100柱纯化后, 纯度可达90 %以上. 以诱导人外周血单个核细胞(PBMC)产生IFN-γ的能力为指标检测复性突变体的活性. 结果显示除C1 04S外 , 其他3个突变体的生物活性均低于野生型hIL-18, C74S、 C112S 和 C 163S 的活性分别是野生型hIL-18活性的5%、 58% 和 11%. 证明Cys74、 Cys163为hIL-18诱导产生IFN-γ的功能所必需.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	裴冬生	徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	68	201	8.0	10.0
2	赵惠仁	徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	14	67	4.0	8.0
3	傅奕	徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	6	28	3.0	5.0
4	孙亚锋	徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心	4	24	2.0	4.0