突变型人白细胞介素-2基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 刘新宇 左爱军 张镜宇 梁东春 郭刚
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 突变 白细胞介素2 大肠杆菌 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 719-721
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2005.11.015

摘要

目的:建立突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础.方法:自人胎盘组织中提取总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)扩增突变型人IL-2基因cDNA,通过对下游引物的设计将编码125位半胱氨酸(C125)的密码子TGT更改为编码丝氨酸的密码子TCT.构建表达型重组质粒pBV-IL-2,温度诱导表达,表达产物行SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western Blot鉴定.结果:DNA序列分析证实,重组质粒pBV-IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放读码框架.SDS-PAGE显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为16.5 ku的外源蛋白产生,经Western印迹(Western Blot)证明为rhIL-2.结论:成功构建了突变型人白细胞介素-2大肠杆菌表达系统,表达产物主要以包涵体的形式存在于碎菌后的沉淀中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁东春		14	64	4.0	7.0
2	郭刚		11	64	4.0	7.0
3	左爱军		10	46	4.0	6.0
4	张镜宇		9	62	4.0	7.0
5	刘新宇		1	0	0.0	0.0