用Red系统快速敲除痢疾杆菌asd基因

• 作者: 冯尔玲 史兆兴 姚潇 王恒樑 苏国富 黄留玉
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 痢疾,杆菌性 Red重组系统 基因敲除 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 172-175
• 页数: 4页
• 分类号: R516.4
• 字数: 3471字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2002.03.004

摘要

目的:用Red系统快速敲除痢疾杆菌asd基因.方法:本研究首先合成一对引物(每一条的5′端与asd基因同源,3′端与氯霉素抗性基因同源),并用来获得氯霉素抗性基因的PCR产物,然后电击转化至大肠杆菌DH5α和痢疾杆菌福氏2a 2457T中,在λRed重组系统的帮助下,通过氯霉素抗性基因两侧的asd基因序列在体内与asd基因发生同源重组,置换了DH5α和2457T基因组中的asd基因,最后又利用氯霉素抗性基因两端的FRT位点,通过FTP位点专一性重组将氯霉素抗性基因剔除.结果与结论:获得了asd基因被完全敲除且不带氯霉素抗性基因的大肠杆菌和痢疾杆菌,使Red系统在大肠杆菌以外微生物中的应用获得成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王恒樑	军事医学科学院生物工程研究所	55	494	12.0	20.0
2	黄留玉	军事医学科学院生物工程研究所	86	1108	18.0	30.0
3	苏国富	军事医学科学院生物工程研究所	35	278	8.0	16.0
4	史兆兴	军事医学科学院生物工程研究所	21	252	6.0	15.0
5	姚潇	军事医学科学院生物工程研究所	7	79	3.0	7.0
6	冯尔玲	军事医学科学院生物工程研究所	29	190	7.0	13.0