核酸提取方法在聚合酶链反应测定乙肝病毒核酸中的评价

• 作者: 周武 陈晓东 陶志华
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 核酸类 聚合酶链反应 肝炎病毒,乙型
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 212-214
• 页数: 3页
• 分类号: R446
• 字数: 2427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1009-9158.2002.04.006

摘要

目的对不同核酸提取方法在荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)含量中应用进行评价,为临床方法学选择和实验结果的评价提供理论依据.方法选用直接煮沸裂解法、NP-40煮沸裂解法、沉淀煮沸裂解法、磁珠核酸提取法等4种核酸提取方法提取乙型肝炎血清标本和含不同含量肝素的血清标本中HBV DNA模板,用荧光实时定量PCR法对其进行准确定量,从提取效率、抗干扰能力方面进行评价.结果 4种核酸提取方法中磁珠核酸提取法提取效率为最高, 对数换算后,以此相对提取效率为100%,则直接煮沸裂解法为最低81%(P<0.05)、NP-40煮沸裂解法为95%(P>0.05)、沉淀煮沸裂解法为88.7%(P<0.05);从抗干扰能力方面,当肝素含量为500 U/ml时,磁珠核酸提取法抗干扰能力最强,沉淀煮沸裂解法次之、直接煮沸裂解法和NP-40煮沸裂解法为最差,其HBV DNA含量抑制率分别为9.4%、13.5%、35.4%、52.7%.结论本实验结果认为磁珠核酸提取法为实验室首选的核酸提取方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶志华	温州医学院附属第一医院检验科	96	602	15.0	20.0
2	陈晓东	温州医学院附属第一医院检验科	70	572	15.0	21.0
3	周武	温州医学院附属第一医院检验科	48	406	12.0	18.0