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摘要:
目的建立人卵巢癌永生化细胞系,为卵巢癌体外研究提供实验模型.方法利用基因重组技术构建猴肾病毒40(SV40)T抗原基因的高效真核表达载体pcD2-SV40.将其转染10例原代培养的早期传代细胞,经G418筛选,抗性克隆扩大培养,建立永生化细胞系.免疫组化检测细胞的上皮起源,用PCR、RT-PCR和Southern Blot方法鉴定SV40 T基因在转染细胞中的表达.观察所建立的永生化细胞系的染色体核型.结果 10例转染细胞中,6例筛选出抗性克隆.角蛋白免疫组化证实3例为上皮起源.其中2例上皮起源细胞得以扩大培养成系,长期稳定传代,分别命名为BUPH:OVSC-2和BUPH:OVCA-3.经鉴定两种细胞系中存在SV40 T在基因水平及转录水平的表达.其染色体核型均符合人体恶性细胞特征.结论利用SV40 T抗原基因进行人卵巢癌原代细胞的永生化是一种可行的、可重复的建系方法,可提高卵巢癌细胞成系机率.
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文献信息
篇名 SV40 T基因诱导的人卵巢癌细胞永生化
来源期刊 中国实用妇科与产科杂志 学科 医学
关键词 卵巢癌/人 永生化 细胞系 猴肾病毒40 T抗原基因
年,卷(期) 2002,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 217-220
页数 4页 分类号 R71
字数 4122字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1005-2216.2002.04.014
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张辛燕 北京大学人民医院妇科肿瘤中心 7 31 4.0 5.0
2 冯捷 北京大学人民医院妇科肿瘤中心 40 207 8.0 11.0
3 钱和年 北京大学人民医院妇科肿瘤中心 15 63 5.0 7.0
4 叶雪 北京大学人民医院妇科肿瘤中心 33 250 8.0 15.0
5 刘广芝 北京大学人民医院妇科肿瘤中心 5 22 3.0 4.0
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研究主题发展历程
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卵巢癌/人 永生化 细胞系 猴肾病毒40 T抗原基因
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国实用妇科与产科杂志
月刊
1005-2216
21-1332/R
大16开
辽宁省沈阳市和平区南京南街9号
8-172
1985
chi
出版文献量(篇)
7716
总下载数(次)
16
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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