大鼠γ-干扰素基因转染大鼠肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞的实验研究

• 作者: 农江 李淑萍 钱桂生 陈维中 马壮 黄桂君
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: γ-干扰素 基因转染 肺泡巨噬细胞 气道上皮细胞
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 73-75
• 页数: 3页
• 分类号: R322.35|R394-33|R394.2
• 字数: 2984字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2002.01.023

摘要

目的构建重组大鼠γ-干扰素真核表达载体,探讨其转染大鼠肺泡巨噬细胞(AM)和气道上皮细胞的可行性及表达水平.方法采用RT-PCR技术克隆了大鼠γ-干扰素,并将其定向克隆到逆转录病毒载体pLXSN上,构成真核表达重组载体.将重组载体转染培养的AM和气道上皮细胞.用PCR法鉴定重组载体整合在细胞基因组DNA中.并检测细胞培养上清中γ-干扰素浓度和活性.结果 DNA测序证明,构建的重组载体中γ-干扰素的基因方向正确,DNA序列与GeneBank中大鼠的γ-干扰素cDNA序列相同.转染后AM和气道上皮细胞基因组DNA的PCR产物电泳可见转染的重组载体DNA片段条带.pLXSN-IFN载体组的AM和气道上皮细胞培养上清中大鼠γ-干扰素浓度和活性显著高于pLXSN空载体组(P<0.01).结论本研究构建的大鼠γ-干扰素重组表达载体可成功地转染大鼠AM和气道上皮细胞,整合入基因组DNA,并分泌有活性的γ-干扰素,为进一步的体内基因转染研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱桂生	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	591	5662	33.0	52.0
2	陈维中	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	39	244	9.0	13.0
3	黄桂君	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	96	478	11.0	16.0
4	李淑萍	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	11	16	2.0	3.0
5	农江	解放军第303医院病理科	17	54	5.0	6.0
6	马壮	第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所	12	47	3.0	6.0