肝癌细胞靶向基因药物分子构形与表达量关系的体外研究

• 作者: 刘小伟 卢放根 吴小平 吴晓英 欧阳春晖 羊东晔
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人白介素-12 脱唾液酸黏蛋白-多聚左旋赖氨酸 分子构形
• 年，卷（期）: 2002,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 651-655
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4477字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-1432.2002.11.003

摘要

目的通过调整靶向基因药物分子构形来提高外源基因的表达量,以解决外源基因在靶细胞中表达效率低的难题.方法应用PCR方法扩增出人白介素-12 P40、P35亚基的cDNA全长并克隆至真核表达载体pcDNA3.1(±)中,构建P(+)/IL-12、P(+)/P40和P(-)/P35三种质粒,分别与脱唾液酸黏蛋白-多聚左旋赖氨酸(ASOR-PLL)结合成两种靶向基因药物[ASOR-PLL-P(+)/IL-12和ASOR-PLL-P(+)/P40、ASOR-PLL-P(-)/P35],透射电镜观察它们在不同辅料浓度中的分子构形;不同构形药物分子转染HepG2细胞,48 h后用半定量RT-PCR和ELISA法检测hIL-12的表达量.结果靶向基因药物分子构形为直径25～150 nm的颗粒状或圆环状时,hIL-12表达量最高;ASOR-PLL-P(+)/P40、ASOR-PLL-P(-)/P35共转染者较ASOR-PLL-P(+)/IL-12转染者hIL-12表达量普遍要高.结论靶向基因药物分子构形对外源基因的表达有重要影响,以直径25～150 nm的颗粒状或圆环状构形为最佳分子构形,外源基因的大小及连接方式对其表达也有一定影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴晓英	中南大学电镜室	52	255	9.0	14.0