结核分枝杆菌的优化PCR检测方法的研究

• 作者: 周宜开 王家玲 王洪君
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 检测方法 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 131-133
• 页数: 3页
• 分类号: R446.61|R378.91+2
• 字数: 1846字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8685.2002.02.001

摘要

[目的]建立了检测结核分枝杆菌的高灵敏度和高特异性PCR扩增体系.[方法]以国内结核病人常见病原菌-结核分枝杆菌、牛分枝杆菌特异性抗原Pab编码基因上的419bp段作为扩增靶序列,扩增引物序列为5'-ACC、ACC、GAG、CGG、TTC、GCC、TGA-3'、5'-GAT、CTG、CGG、GTC、GTC、CCA、GGT-3'.[结果]变性温度选择69℃-70℃.PCR扩增体系的成份经优化,选择引物浓度为0.30μmol/L,dNTP浓度为150μmol/L,MgCl2浓度为3.5mmol/L.[结果]该体系对11株标准菌株和12株临床分离菌株提纯的染色体进行扩增,其中卡介苗、结核分枝杆菌、牛分枝杆菌的扩增为阳性,其他分枝杆菌为阴性.[结论]以提纯的染色体DNA作模板,该体系可检出5fg结核杆菌染色体DNA,相当于一个结核分枝杆菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周宜开	华中科技大学同济医学院环境医学研究所	99	864	16.0	22.0
2	王家玲	华中科技大学同济医学院环境医学研究所	5	116	4.0	5.0