结核分枝杆菌19-kDa蛋白在大肠杆菌中的表达

• 作者: 吴雪琼 张灵霞 李邦印 韩慧新
• 来源期刊: 中国全科医学
• 关键词: 结核 分枝杆菌 19-kDa 克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1057-1059
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2006.13.004

摘要

目的通过基因工程技术获得重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白.方法应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37Rv19-kDa DNA序列;以质粒pET24b为表达载体,构建19-kDa重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3);在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下,分别对不同诱导时间的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),凝胶经考马斯亮蓝染色检测蛋白.结果重组质粒pET24b-19-kDa测序表明与报道的序列相同.它在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以可溶性形式表达.不同IPTG诱导时间实验表明重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白诱导3～4 h重组蛋白在大肠杆菌中的表达量最高.结论 pET24b-19-kDa大肠杆菌工程株可高表达结核分枝杆菌重组19-kDa蛋白.