地高辛标记的小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅰ RNA 探针的制备和应用

• 作者: 丁斐 严美娟 沈爱国 王汉洲 顾建新 龚蕾蕾
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: β-1,4半乳糖基转移酶-I RNA原位杂交探针 RT-PCR 地高辛标记 小鼠
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 365-368
• 页数: 4页
• 分类号: R338
• 字数: 2946字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7547.2003.04.003

摘要

为了制备小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶I(β-1,4-galactosyltransferase 1,β-1,4-GalT-1)地高辛标记的RNA探针以探讨β-1,4-GalT-I mRNA在坐骨神经组织的表达定位,本研究用提取的小鼠脑总RNA,采用RT-PCR方法,得到β-1,4-GalT-I的DNA片断,将其克隆到pGEM-T载体;采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-I RNA探针;运用点杂交的方法分析标记探针的灵敏度;最后应用该探针,通过原位杂交的方法,分析β-1,4-GalT-I mRNA在小鼠坐骨神经的表达.结果:构建了β-1,4-GalT-I/pGEM-T质粒,获得了高效价的地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-I RNA探针,应用该探针发现β-1,4-GalT-J在小鼠坐骨神经髓鞘中有表达.以上结果表明,制备的地高辛标记的正、反义β-1,4-GalT-I RNA原位杂交探针可特异地检测β-1,4-GalT-1 mRNA在组织中的表达.本研究为进一步分析β-1,4-GalT-I在坐骨神经及其它神经组织发育和损伤过程中的表达奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁斐	南通医学院江苏省神经再生重点实验室	50	329	10.0	15.0
2	顾建新	复旦大学上海医学院基因研究中心	37	173	6.0	12.0
3	沈爱国	南通医学院江苏省神经再生重点实验室	19	68	6.0	7.0
5	严美娟	南通医学院江苏省神经再生重点实验室	9	14	2.0	2.0
8	龚蕾蕾	南通医学院江苏省神经再生重点实验室	4	4	2.0	2.0
9	王汉洲	复旦大学上海医学院基因研究中心	10	20	3.0	4.0