IL-18基因的克隆及其在宫颈癌细胞中的表达研究

• 作者: 包珊 姚书忠 杨舒盈 符生苗
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素18宫颈癌 基因克隆 基因表达 基因治疗
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 571-573
• 页数: 3页
• 分类号: R737.33
• 字数: 2647字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9727.2003.05.005

摘要

目的研究白细胞介素18(Interleukin-18,IL18)基因能否在宫颈癌细胞(Hela细胞)中表达.方法从人胎脑RNA中RT-PCR扩增IL-18基因,构建真核基因表达载体pcDNA3.1(+)-IL18,并转染到宫颈癌细胞中,收集细胞转染后24～48h上清,Western-Blotting检测IL18基因在宫颈癌细胞中的短暂表达.G418筛选稳定表达IL18基因的单克隆宫颈癌细胞,利用RT-PCR、Western-Blotting检测IL18基因在宫颈癌细胞中的稳定表达.研究为三组:1.空白Hela细胞组;2.空载体pcDNA3.1(+)转染Hela细胞组;3.pcDNA3.1(+)-IL18传染Hela细胞组.结果1.成功克隆IL18基因.2.成功构建真核基因表达载体pcDNA3.1(+)-IL18.3.短暂表达结果:Western-Blotting检测pcDNA3.1(+)-IL18组在14.4至20.1KDa之间有一特异性条带(18.3KDa),空白Hela细胞组和空载体pcDNA3.1(+)组均没有任何条带.4.稳定表达检测结果:(1)RT-PCR结果:pcDNA3.1(+)-IL18组扩增到一特异性DNA条带,位于750至1000bp之间,空白Hela细胞组和空载体pcDNA3.1(+)组均没有扩增到任何条带.(2)Western-Blotting结果:pcDNA3.1(+)-IL18组在14.4至20.1KD之间有一特异性条带(18.3KDa),空白Hela细胞组和空载体pcDNA3.1(+)组均没有任何条带.结论1.成功克隆IL18基因并构建真核基因表达载体pcDNA3.1(+)-IL18.2.IL18基因成功导入到宫颈癌细胞Hela细胞中,并且有表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	符生苗		160	658	11.0	16.0
2	姚书忠	中山大学附一医院妇产科	174	2140	24.0	40.0
3	杨舒盈		81	349	10.0	16.0
4	包珊		12	54	3.0	7.0