PCR-ELISA和PCR-PAGE法检测血液肿瘤细胞株的端粒酶活性

• 作者: 何冬梅 张洹
• 来源期刊: 暨南大学学报(自然科学与医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 端粒酶 聚合酶链反应 酶联免疫测定 聚丙烯酰胺凝胶电泳
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 42-45
• 页数: 4页
• 分类号: R733.7
• 字数: 2827字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2003.02.009

摘要

目的:通过端粒酶聚合酶链反应-酶联免疫测定(PCR-ELISA)和聚合酶链反应-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PCR-PAGE)方法检测血液肿瘤细胞株HL-60、K562、Raji的端粒酶活性,探讨其临床应用价值.方法:PCR-ELISA方法是将端粒重复序列PCR变性产物与地高辛标记且对端粒重复片段特异的探针杂交,杂交产物通过ELISA进行测定.PCR-PAGE法是将端粒重复序列PCR产物直接进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,通过硝酸银染色测定端粒酶活性.结果:在端粒酶PCR-ELISA方法检测中,PCR在25～35次循环之间,吸光度A值与循环次数呈线性关系,35～45次循环已达到平台期.PCR-ELISA法检测显示HL-60、K562、Raji细胞均表达高水平的端粒酶活性,吸光度A均值分别为2.362、2.336、2.145.对HL-60、K562、Raji细胞的端粒重复序列扩增的PCR产物直接进行PAGE电泳、银染均呈现3条以上间隔6 bp的特征性阶梯状条带.结论:对端粒重复序列PCR产物可同时进行ELISA检测和PAGE-银染,两种方法均可用于恶性肿瘤的临床诊断,ELISA法更为灵敏而简单,且可相对定量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何冬梅	暨南大学医学院血液病研究所	82	404	11.0	16.0
2	张洹	暨南大学医学院血液病研究所	219	1146	17.0	21.0