大鼠胃壁细胞GnRH受体的定位及GnRH类似物对壁细胞内钙的影响

• 作者: 吕宝真 孙绪德 蒲若蕾 陈蕾 黄威权
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: GnRH类似物 GnRH受体 胃壁细胞 钙 Fluo-3-AM 免疫组织化学 原位杂交 激光共聚焦显微镜
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 79-84
• 页数: 6页
• 分类号: Q579.2
• 字数: 5343字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.2003.01.017

摘要

目的观察促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)受体在培养的大鼠胃粘膜壁细胞中的定位,并探讨GnRH类似物阿拉瑞林(alarelin)对壁细胞内游离钙动员的机制.方法采用免疫组织化学和原位杂交技术;应用Ca2+指示剂Fluo-3-AM作为细胞内钙离子的荧光探针,对负载培养的胃壁细胞,应用激光共聚焦显微镜技术检测单个细胞内钙荧光强度的变化.结果大鼠胃壁细胞呈GnRH受体免疫反应阳性,阳性物质位于细胞质,细胞核为阴性;同样壁细胞内可检测到GnRH受体mRNA杂交信号,阳性物质位于细胞质,细胞核为阴性;胞内Ca2+浓度变化为:1.在Hank液中,GnRH类似物浓度为10-8、10-7、10-6 mol/L时,胃壁细胞内Ca2+浓度逐渐升高,其峰高(峰值减去静息值)分别为7.1±1.4、12.1±1.7、16.8±2.2.其达峰时间也逐渐增快,分别为34.2±6.4s、18.9±1.2s、10.4±2.3s.相邻两组间其峰高及达峰时间均存在显著性差异(P＜0.05),且呈明显剂量依赖性.2.在D-Hank液(去除外钙)中,阿拉瑞林可轻度短暂升高胞内Ca2+;用内罗啶孵育后再加入阿拉瑞林也可轻度短暂升高胞内Ca2+,二者无显著性差异.3.当用拉西地平孵育后再加入阿拉瑞林,可明显抑制胞内Ca2+的增加.4.当用PLC(磷酸脂二酶)抑制剂和PKC(蛋白激酶C)抑制剂孵育后,再加阿拉瑞林,其胞内Ca2+升高仍受到抑制,明显小于单独应用10-6 mol/L的阿拉瑞林组(P＜0.01).结论大鼠胃壁细胞能自身表达GnRH受体;GnRH类似物可明显升高胃壁细胞内Ca2+浓度,且胞内Ca2+的增加主要源于外钙的内流,部分源于内钙的释放.其中细胞外钙的内流主要是通过L-型钙通道实现的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄威权	第四军医大学组织学胚胎学教研室	88	748	15.0	20.0
2	孙绪德	第四军医大学唐都医院麻醉科	106	586	12.0	17.0
3	陈蕾	第四军医大学组织学胚胎学教研室	12	88	7.0	9.0
4	蒲若蕾	第四军医大学组织学胚胎学教研室	11	80	6.0	8.0
5	吕宝真	第四军医大学组织学胚胎学教研室	3	33	3.0	3.0