根癌农杆菌对云南红豆杉原生质体的转化

• 作者: 姜绍通 潘丽军 罗建平
• 来源期刊: 世界科学技术-中药现代化
• 学科: 生物学
• 关键词: 云南红豆杉 原生质体 根癌农杆菌 转化 紫杉醇
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 49-52
• 页数: 4页
• 分类号: Q94
• 字数: 2916字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-3849.2003.03.013

摘要

本文介绍了根癌农杆菌T-DNA对云南红豆杉原生质体的转化,分析了转化系的紫杉醇合成能力.实验以生长20 d的云南红豆杉幼茎诱导的淡黄色愈伤组织为材料,经酶解可分离出大量有活力的原生质体.在由B5无机盐、KM有机成分、3.0 mg/L 2,4-D、0.1 mg/L KT和0.45 mol/L果糖组成的培养基中培养1周后,原生质体再生细胞持续分裂形成细胞团.根癌农杆菌对原生质体的转化能力与原生质体生长状态及菌株相关.虽然刚分离的或已再生细胞壁的原生质体不能被根癌农杆菌转化,但由10个以上细胞组成的原生质体克隆和根癌农杆菌B6S3菌株共培养后可实现T-DNA转化,高压纸电泳检测转化系具有冠瘿碱的合成,转化率约为5%.HPLC证实转化系具有合成紫杉醇的能力,但不同转化系中紫杉醇含量变异很大,最高含量为0.076%,是对照愈伤组织的6倍,表明T-DNA的插入改变了培养细胞对紫杉醇的合成.获得的高产转化系细胞生长比对照低,但继代培养中其生长和紫杉醇积累基本保持稳定.尽管转化系合成紫杉醇能力远未达到商业化生产的要求,但研究通过T-DNA对原生质体的转化而实现插入诱变,可以为分离高产紫杉醇优良细胞系提供单细胞筛选系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗建平	合肥工业大学生物与食品工程学院	123	2446	26.0	43.0
2	潘丽军	合肥工业大学生物与食品工程学院	179	2180	23.0	35.0
3	姜绍通	合肥工业大学生物与食品工程学院	398	4557	29.0	43.0