发色底物法定量测定重组u-PA产品的总活性和单链比例

• 作者: 姜燕 张正光 张翊 李世崇 肖成祖 胡显文 胡铁强 胥照平 饶春明 高丽华
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 尿激酶型纤溶酶原激活剂 活性 S-2444 尿激酶原 嗜热菌蛋白酶
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 349-352,376
• 页数: 5页
• 分类号: R963
• 字数: 4343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2003.05.010

摘要

目的:建立一种发色底物酶水解方法定量分析重组尿激酶型纤溶酶原激活剂(u-PA)中的总活性及其单链酶原比例.方法:用嗜热菌蛋白酶激活u-PA转化成具有催化活性的双链尿激酶,再用尿激酶的发色底物S-2444测定u-PA的总活性.在非激活条件下,u-PA产品中的单链酶原不会催化水解S-2444底物,因而可以测定其单链酶原比例.结果:优化了嗜热菌蛋白酶激活u-PA的反应条件和尿激酶催化水解S-2444的反应条件.用这种方法测定了用CHO细胞表达的基因重组u-PA产品,单链比例大于98%,比活性约为11×104 U/mg.结论:用发色底物法测定重组人u-PA产品中的总活性和单链比例具有很好的重复性和准确性.