影响电转化效率的几个因素探讨

• 作者: 包其郁 包静月 孙永巧 徐微 徐祖元 杨焕明 王慧峰
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 电转化 转化效率 乙醇沉淀法 稀释法
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 9-11
• 页数: 3页
• 分类号: Q785
• 字数: 2017字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2003.01.004

摘要

目的:探讨大规模DNA测序技术平台中影响电转化效率的几个因素.方法:电转化法测定经稀释或乙醇沉淀处理后连接反应混合物的转化效率.结果:电转化电压在2.1～2.5 kV之间可获得高转化效率;乙醇沉淀法虽能降低盐浓度,但同时使微量质粒DNA丢失,不能提高电转化效率;稀释法能提高转化效率5倍左右;连接反应物转化时,感受态细胞悬浮于无菌去离子水中的转化效率比悬浮于10%甘油无菌去离子水中的高.结论:降低连接反应混合物的盐浓度能有效提高电转化效率,在大规模DNA测序技术平台中,急需研究开发一种纯化回收微量质粒DNA的简单而有效的方法.